Bidhaa

Sawa na virusi vingine vya RNA zenye nyuzi chanya, virusi vya tombus huigwa na changamano cha kuiga virusi vya utando (VRC).VRC ina p92 yenye virusi inayotegemea RNA polymerase (RdRp), chaperone ya virusi p33 RNA, na protini nyingi za mwenyeji zilizochaguliwa.Ili kuwa RdRp amilifu baada ya tafsiri yake, protini ya urudufishaji p92 inapaswa kujumuishwa kwenye VRC, ikifuatiwa na kuwezesha.Hapo awali tumeonyesha katika jaribio la msingi la dondoo lisilo na seli ya chachu kwamba uanzishaji wa Tomato bushy Stunt virus (TBSV) RdRp unahitaji kipengele/vipangishi vinavyoyeyuka.Katika makala haya, tunatambua protini ya seli ya mshtuko wa joto 70 (Hsp70) kama kipengee kilichochaguliwa kwa pamoja kinachohitajika ili kuwezesha TBSV RdRp iliyopunguzwa ya N-terminally.Kwa kuongeza, kuzuia-msingi wa molekuli ndogo ya kazi ya Hsp70 huzuia awali ya RNA na tombusvirus RdRp in vitro.Zaidi ya hayo, tunaonyesha kwamba phospholipids zisizo na upande, yaani, phosphatidylethanolamine (PE) na phosphatidylcholine (PC), huongeza uanzishaji wa RdRp katika vitro.Kinyume chake, phosphatidylglycerol (PG) inaonyesha athari kali na kuu ya kuzuia uanzishaji wa in vitro RdRp.Pia tunaonyesha kuwa PE na PC huchochea mwingiliano wa RdRp-viral plus-strand RNA [(+)RNA], huku PG inazuia kuunganishwa kwa RNA ya virusi kwa RdRp.Kulingana na dhima za kichocheo dhidi ya vizuizi vya phospholipids mbalimbali katika uanzishaji wa virusi vya tombusvirus RdRp, tunapendekeza kwamba muundo wa lipid wa membrane ndogo ya seli inayolengwa inaweza kutumiwa na virusi vya tombus kudhibiti mkusanyiko mpya wa VRC wakati wa maambukizi. Polimasi ya RNA inayotegemea virusi ya RNA (RdRp), ambayo inawajibika kwa kuunganisha kizazi cha virusi cha RNA katika seli zilizoambukizwa za virusi kadhaa vya RNA chanya, haifanyi kazi hapo awali.Mkakati huu una uwezekano wa kuzuia usanisi wa virusi vya RNA katika saitosoli ambayo ingesababisha kwa haraka kuingizwa kwa majibu ya kizuia virusi yanayotokana na RNA.Wakati wa mkusanyiko wa changamano cha unakilishi kilichofungamana na utando, virusi vya RdRp huwashwa kupitia mchakato usioeleweka kikamilifu ambao hufanya RdRp kuwa na uwezo wa usanisi wa RNA.Kwa kutumia TBSV RdRp, tunaonyesha kuwa chaperone ya simu ya mkononi ya Hsp70 na phospholipids zisizoegemea upande wowote huwezesha kuwezesha RdRp.Kinyume chake, phosphatidylglycerol (PG) ina athari kubwa ya kuzuia katika uanzishaji wa in vitro RdRp na mwingiliano wa RdRp-virusi wa RNA, na kupendekeza kuwa kikoa kidogo cha utando kinachozunguka RdRp huathiri sana uwezo wake wa usanisi wa RNA.Kwa hivyo, uanzishaji wa RdRp ya virusi huenda unategemea vipengele vingi vya jeshi katika seli zilizoambukizwa.