Bidhaa

Mkusanyiko wa nyuklia wa aina ya mutant ya protini ya nyuklia Lamin-A, iitwayo Progerin (PG) au Lamin AΔ50, hutokea katika Hutchinson-Gilford Progeria Syndrome (HGPS) au Progeria, ugonjwa wa kuzeeka unaoharakishwa.Mojawapo ya dalili kuu za ugonjwa huu wa kijeni ni upotezaji wa mafuta chini ya ngozi kutokana na lipodystrophy. Tulishawishi kwa uthabiti usemi wa binadamu PG na GFP -Green Fluorescent Protein- kama udhibiti katika seli 3T3L1 kwa kutumia mfumo wa lentiviral kusoma athari ya usemi wa PG katika uwezo wa kutofautisha wa laini hii ya seli, mojawapo ya miundo ya adipojeki inayotumika zaidi.Proteomics za kiasi (iTRAQ) ilifanywa ili kusoma athari za mkusanyiko wa PG.Kadhaa ya protini modulated walikuwa kuthibitishwa na immunoblotting na halisi wakati PCR.Utendakazi wa mitochondrial ulichambuliwa kwa kipimo cha a) shughuli ya msingi ya mitochondrial, b) anioni ya superoxide na c) ufanisi wa mtu binafsi wa mchanganyiko tofauti wa mnyororo wa kupumua. kupungua kwa kiwango cha uenezi na kasoro katika uwezo wa adipojeni ikilinganishwa na udhibiti.Uchanganuzi wa kiasi cha proteomics ulionyesha protini 181 kwa kiasi kikubwa (p<0.05) zilizobadilishwa katika preadipocytes zinazoonyesha PG.Utendaji wa mitochondrial umeharibika katika seli zinazoonyesha PG.Hasa, tumegundua ongezeko la shughuli ya tata ya I na uzalishaji zaidi wa anion ya Superoxide.Incubation na viumbe hai vya Oksijeni (ROS) huchangia kupungua kwa proteolysis ya kiotomatiki kama inavyofichuliwa na uwiano wa LC3-II/LC3-I. Usemi katika seli 3T3L1 hukuza mabadiliko katika Michakato kadhaa ya Kibiolojia, ikiwa ni pamoja na muundo wa cytoskeleton, metaboli ya lipid, kalsiamu. udhibiti, tafsiri, kukunja protini na uzalishaji wa nishati na mitochondria.Data yetu huimarisha mchango wa mkusanyiko wa ROS kwa phenotype ya kuzeeka mapema na kuanzisha kiungo kati ya kutofanya kazi kwa mitochondrial na kupoteza proteostasis katika HGPS.