Bidhaa

Maswali yameulizwa mara kwa mara hivi majuzi: 1. Kwa nini jaribio la ONPG linaweza kutumiwa kutofautisha ucheleweshaji wa lactose uliochelewa?2. Kwa nini kiwango cha kitaifa kinasema kwamba ni muhimu kutumia 3% ya chuma cha trisaccharide ya kloridi ya sodiamu (au chuma cha trisaccharide) kwa jaribio la ONPG?3. Kwa Vibrio parahaemolyticus, wakati wa kufanya mtihani wa OPNG, kwa nini toluini inapaswa kuongezwa kwa njia ya kushuka kulingana na kiwango?Je, kazi ni nini?

Kampuni yetu imekagua taarifa nyingi, ikatoa muhtasari, na kushiriki nawe hapa chini:

Kanuni: Jina la Kichina la ONPG ni o-nitrobenzene-β-D-galactopyranoside.ONPG inaweza kuwa hidrolisisi kuwa galaktosi na o-nitrophenol ya njano (ONP) na β-galactosidase, hivyo shughuli ya β-galactosidase inaweza kutambuliwa na mabadiliko ya rangi ya utamaduni wa kati.

Lactose ni sukari ambayo microorganisms nyingi zinahitaji kuchunguza.Kimetaboliki yake inahitaji enzymes mbili, moja ni permease ya seli, lactose huingia seli chini ya hatua ya permease;nyingine ni β-galactosidase, ambayo hidrolisisi lactose katika galactose.Lactose na sukari.β-Galactosidase pia inaweza kutenda moja kwa moja kwenye ONPG ili kuibadilisha kuwa galaktosi na o-nitrophenol ya njano (ONP).Inaweza kufanyika katika 24h, hata kwa fermenters lactose kuchelewa.Kwa hiyo, inaelezea matokeo ya uchunguzi wa kuokota utamaduni 1 kutoka kwenye slant ya agar na kuiingiza kwenye mduara kamili saa 36 ° C kwa 1-3h na 24h.Ikiwa β-galactosidase inazalishwa, itageuka njano katika 1-3h, ikiwa hakuna enzyme hiyo, haitabadilisha rangi katika 24h.

Kulingana na enzymes mbili zilizo hapo juu, vijidudu vinaweza kugawanywa katika vikundi vifuatavyo:

1 lactose-fermenting (saa 18-24) bakteria na permease na β-galactosidase P + G +;

2 Vichachushio vya lactose vilivyochelewa (kuchukua muda mrefu zaidi ya saa 24) vinakosa upenyezaji lakini vina galactosidase: P- G+.

3 Fermenters zisizo za lactose zisizo na permease na galactosidase: P- G-.

Jaribio la ONPG linaweza kutumika kutofautisha bakteria wanaochachusha lactose-lag-fermenting (P-G+) kutoka kwa bakteria ya lactose isiyochacha (PG-), kama vile:

1 Tofautisha vichachuzi vya lactose marehemu (P- G+) kutoka kwa vichachuzi visivyo vya lactose (P- G-).

(a) Citrobacter (+) na Salmonella arizonae (+) kutoka Salmonella (-).

(b) Escherichia coli (+) kutoka kwa Shigella sonnei (-).

Kwa nini jaribio la ONPG lilifanywa kwa kutumia utamaduni wa usiku mmoja kwenye trisaccharide ya kloridi ya sodiamu 3% (trisaccharide ya chuma)?Kampuni yetu imeshauriana habari nyingi, lakini hakuna taarifa wazi.Katika tovuti ya FDA pekee, imeandikwa kwamba "Chanja tamaduni zitakazojaribiwa kwenye miteremko ya chuma ya sukari mara tatu na kuanika kwa saa 18 kwa 37°C (au halijoto nyingine inayofaa, ikihitajika) . Virutubisho (au vingine) vya agar vilivyo na 1.0 % lactose pia inaweza kutumika."inamaanisha: bakteria zilizojaribiwa zilichanjwa kwenye chuma cha kati cha trisaccharide na kukuzwa kwa 37°C kwa 18h.Virutubisho vya agar slants (au nyingine) kati yenye lactose 1% pia inakubalika.Kwa hiyo, inachukuliwa kuwa kati ya chuma cha trisaccharide ina lactose.Baada ya ukuaji wa usiku mmoja, bakteria wametoa β-galactosidase nzuri hai.Kwa kutumia bakteria kama hizo, ONPG inaweza kuoza na β-galactosidase haraka.Jambo la majaribio ni haraka na linaonyeshwa vizuri zaidi.Kwa kuongeza, toluini na umwagaji wa maji kwa dakika 5 zote ni ili kutoa kikamilifu β-galactosidase.