Bidhaa

LecA (PA-IL) ni lectin na adhesin ya cytotoxic inayozalishwa na Pseudomonas aeruginosa ambayo hufunga galactosides haidrofobi na umaalumu wa juu na mshikamano.Kwa kutumia mchanganyiko wa tafsiri ya lecA-egfp na uchanganuzi wa immunoblot wa matrix ya ziada ya seli ya kibayolojia, tunaonyesha kuwa lecA inaonyeshwa katika seli zinazokuzwa na biofilm.Katika majaribio ya filamu tuli ya kibayolojia kwenye polystyrene na chuma cha pua, kina cha biofilm na kufunika uso kilipunguzwa na mabadiliko ya lecA na kuimarishwa katika aina ya LecA-producing PAO-P47.Ufunikaji wa uso wa biofilm na aina ya mzazi, PAO-P47 lakini si mabadiliko ya lecA kwenye kuponi za chuma pia ulizuiwa na ukuaji mbele ya isopropyl-beta-D-thiogalactoside (IPTG) au p-nitrophenyl-alpha-D-galactoside ( NPG).Zaidi ya hayo, filamu za kibayolojia zilizokomaa zilizoundwa bila kuwepo kwa galaktosidi hizi za haidrofobi zinaweza kutawanywa kwa kuongezwa kwa IPTG.Kinyume chake, nyongeza ya p-nitrophenyl-alpha-L-fucose (NPF) ambayo ina mshikamano wa juu kwa P. aeruginosa LecB (PA-IIL) lecti n haikuwa na athari kwenye uundaji au mtawanyiko wa biofilm.Ukuaji wa Planktonic wa P. aeruginosa PAO1 haukuathiriwa na uwepo wa IPTG, NPG au NPF, wala aina hiyo haikuweza kutumia sukari hizi kama vyanzo vya kaboni, na kupendekeza kuwa athari zilizoonekana kwenye uundaji wa biofilm zilitokana na kizuizi cha ushindani cha LecA-ligand. kufunga.Matokeo sawia pia yalipatikana kwa filamu za kibayolojia zinazokuzwa chini ya hali ya mtiririko unaobadilika kwenye kuponi za chuma, na kupendekeza kuwa LecA inachangia usanifu wa biofilm ya P. aeruginosa chini ya hali tofauti za mazingira.

Alpha-L-fucosidase (EC 3.2.1.51) inayoweza kutoa mabaki ya t-fucosyl kutoka kwa mnyororo wa kando wa oligosaccharides ya xyloglucan imegunduliwa kwenye majani ya mimea ya Arabidopsis.Zaidi ya hayo, alpha-L-fucosidase yenye umaalum sawa wa substrate ilisafishwa kutoka kwa majani ya kabichi (Brassica oleracea) ili kutoa mkanda mmoja kwenye SDS-PAGE.Mifuatano miwili ya peptidi ilipatikana kutoka kwa ukanda huu wa protini, na ilitumiwa kutambua usimbaji wa jeni la Arabidopsis kwa alpha-fucosidase ambayo tunapendekeza kuiita AtFXG1.Zaidi ya hayo, jeni la Arabidopsis lenye homolojia yenye alpha-L-fucosidase inayojulikana pia limepatikana, na tulipendekeza kuliita kama AtFUC1.AtFXG1 na ATFUC1 zote mbili zilionyeshwa kwa njia tofauti katika seli za Pichia pastoris na shughuli za alpha-L-fucosidase zilizofichwa kwa njia ya utamaduni.Alpha-L-fucosidase iliyosimbwa na AtFXG1 ilikuwa hai dhidi ya oligosaccharides kutoka xyloglucan XXFG na pia dhidi ya 2'-fucosyl-lactitol lakini si dhidi ya p-nitrophenyl-alpha-L-fucopyranoside.Walakini, AtFUC1 iliyoonyeshwa kwa njia tofauti ilikuwa hai dhidi ya 2'-fucosyl-lactitol pekee.Kwa hivyo, ya kwanza lazima ihusiane na kimetaboliki ya xyloglucan.