Bidhaa

Chumvi ya acetate ya Tris hutumiwa mara kwa mara katika utayarishaji wa bafa ya TAE (Tris-acetate-EDTA), ambayo hutumiwa kama buffer inayoendesha na katika geli za agarose.Bafa ya Tris Acetate-EDTA inatumika kwa electrophoresis ya jeli ya agarose ya DNA lakini pia inatumika kwa elektrophoresis ya jeli ya agarose isiyo na denaturing ya RNA.DNA yenye nyuzi-mbili huelekea kufanya kazi kwa kasi zaidi katika TAE kuliko katika vihifadhi vingine na inaweza kuchoka wakati wa elektrophoresis iliyopanuliwa.Mzunguko wa bafa au uingizwaji wa bafa wakati wa elektrophoresis iliyopanuliwa inaweza kurekebisha uwezo wa chini wa uakibishaji.Inaweza kutumika katika viwango tofauti kusoma uhamaji wa DNA katika suluhisho.Kwa kuwa borate katika bafa ya TBE (Tris-Borate-EDTA Buffer, 10X Powder Pack, sc-296651) ni kizuizi chenye nguvu cha vimeng'enya vingi, bafa ya TAE inapendekezwa wakati wa kuangalia utumizi wa enzymatic kwa sampuli ya DNA.Chumvi ya Tris acetate pia ni buffer yenye usikivu wa juu katika majaribio ya ATP yenye kimulimuli luciferase.

Matumizi: TAE inayoendesha bafa ndiyo inayotumika zaidi bafa ya DNA agarose gel electrophoresis, na pia hutumiwa kwa electrophoresis ya asili ya gel ya agarose ya RNA.DNA yenye ncha mbili huwa na mwendo wa kasi zaidi katika TAE kuliko katika vihifadhi vingine, lakini pia inashindwa kuogelea kwa sababu ya kupungua kwa ioni za bafa wakati wa elektrophoresis ya muda mrefu.Kuendesha baiskeli kwa bafa au kubadilishana bafa wakati wa elektrophoresis ya muda mrefu kunaweza kufidia uwezo wa chini wa bafa.2 Punguza bafa ya TAE iliyokolezwa ili kupata bafa 1 mMTAE iliyo na 40 mm Tris acetate na 1 mm EDTA, pH 8.3.1 mMTAE bafa inaweza kutumika katika geli za agarose na kama buffer inayoendesha.Kwa azimio la juu, inashauriwa kuwa voltage iliyotumiwa iwe chini kuliko 5V / cm (umbali kati ya electrodes ya kitengo).

Utumizi: TAE inayotumia bafa ndiyo inayotumika zaidi bafa ya DNA agarose gel electrophoresis katika gel ya Chemicalbook, na pia inatumika kwa ajili ya electrophoresis ya jeli ya agarose ya RNA isiyo na denaturing.DNA yenye ncha mbili huwa na mwendo wa kasi zaidi katika TAE kuliko katika vihifadhi vingine, lakini pia inashindwa kuogelea kwa sababu ya kupungua kwa ioni za bafa wakati wa elektrophoresis ya muda mrefu.Kuendesha baiskeli kwa bafa au kubadilishana bafa wakati wa elektrophoresis ya muda mrefu kunaweza kufidia uwezo wa chini wa bafa.Bafa ya TAE iliyokolezwa ilipunguzwa ili kupata bafa 1 mMTAE iliyo na 40 mm Tris acetate na 1 mm EDTA, pH 8.3.1 mMTAE bafa inaweza kutumika katika geli za agarose na kama buffer inayoendesha.Kwa azimio la juu, inashauriwa kuwa voltage iliyotumiwa iwe chini kuliko 5V / cm (umbali kati ya electrodes ya kitengo).

Matumizi: Katika utambuzi wa ATP na kimulimuli luciferase, bidhaa hii ni bafa nyeti zaidi;utambuzi wa kuunganisha glutamate.

Kifungo kinachoweza kuondolewa cha [3H]l-glutamic asidi kwa nyenzo zisizo za kipokezi.

[3H]L-glutamic asidi inayofunga kwenye mirija ya microfuge na glasi ilichunguzwa katika vihifadhi vinne.Ufungaji wa usuli kwa nyenzo hizi haukuzingatiwa, lakini uliongezwa kwa upenyezaji katikati au ufyonzaji katika bafa ya Tris-HCl na Tris-citrate.Kifungo hiki kilikuwa kidogo sana au Wakati HEPES-KOH, au bafa ya Tris-acetate ilitumiwa badala yake.[3H]Kifungashio cha L-glutamate kwenye mirija ya mikrofuji kilizuiliwa na L- lakini si isoma za D za glutamate na aspartate.Asidi ya DL-2-amino-7-phosphonoheptanoic pia haikuzuia kumfunga.Misombo mingine ambayo ilionyesha kizuizi cha chini hadi wastani kilikuwa: N-methyl-D-aspartate, quisqualate, L-glutamic acid diethyl ester, N-methyl-L-aspartate, kainate, na 2-amino-4 -phosphonobutyrate.Kufunga kulizuiwa na utando wa ubongo wa panya.Kifungashio cha glutamati kinachotegemea protini [3H] kilipatikana kwa utayarishaji wa utando ulioyeyushwa mara kwa mara wakati ufungaji ulipofanywa katika bafa ya Tris-acetate.Inapendekezwa kuwa bafa ya Tris-acetate au HEPES -KOH itumike katika jaribio la glutamate bin ding.Iwapo bafa ya Tris-HCl au Tris-citrate inatumiwa, jaribio lifaalo la udhibiti linafaa kufanywa ili kusahihisha kwa kuunganisha kwa mirija ya microfuge au vichujio vya nyuzi za glasi.