Bidhaa

X-gal (pia imefupishwa BCIG kwa 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-galactopyranoside) ni mchanganyiko wa kikaboni unaojumuisha galaktosi iliyounganishwa na indole mbadala.Mchanganyiko huu uliundwa na Jerome Horwitz na washiriki mwaka wa 1964. Jina rasmi la kemikali mara nyingi hufupishwa hadi misemo isiyo sahihi lakini pia isiyosumbua sana kama vile bromochloroindoxyl galactoside.X kutoka indoxyl inaweza kuwa chanzo cha X katika mnyweo wa X-gal.X-gal mara nyingi hutumiwa katika biolojia ya molekuli kupima uwepo wa kimeng'enya, β-galactosidase, badala ya lengo lake la kawaida, β-galactoside.Pia hutumiwa kuchunguza shughuli za enzyme hii katika histochemistry na bacteriology.X-gal ni mojawapo ya glycosides na esta nyingi za indoxyl ambazo hutoa misombo ya bluu isiyoyeyuka sawa na rangi ya indigo kutokana na hidrolisisi iliyochochewa na kimeng'enya.

X-gal ni analogi ya lactose, na kwa hivyo inaweza kuwa hidrolisisi na kimeng'enya cha β-galactosidase ambacho hupasua dhamana ya β-glycosidic katika D-lactose.X-gal, ikipasuliwa na β-galactosidase, hutoa galaktosi na 5-bromo-4-chloro-3-hydroxyindole - 1. Ya mwisho kisha hupungua kwa hiari na kuoksidishwa kuwa 5,5'-dibromo-4,4'-dichloro. -indigo - 2, bidhaa yenye rangi ya samawati isiyoweza kuyeyuka.X-gal yenyewe haina rangi, kwa hivyo uwepo wa bidhaa ya rangi ya samawati unaweza kutumika kama mtihani wa uwepo wa β-galactosidase hai.Hii pia inaruhusu β-galactosidase ya bakteria (inayoitwa lacZ) kutumika kama ripota katika matumizi mbalimbali.

Katika uchanganuzi wa miseto miwili, β-galactosidase inaweza kutumika kama ripota kutambua protini zinazoingiliana.Kwa njia hii, maktaba za jenomu zinaweza kuchunguzwa kwa mwingiliano wa protini kwa kutumia chachu au mfumo wa bakteria.Pale ambapo kuna mwingiliano mzuri kati ya protini zinazokaguliwa, itasababisha kufungwa kwa kikoa cha kuwezesha kwa mtangazaji.Ikiwa mkuzaji ameunganishwa na jeni la lacZ, uzalishaji wa β-galactosidase, ambayo husababisha kuundwa kwa makoloni ya rangi ya bluu mbele ya X-gal, kwa hiyo itaonyesha ushirikiano wa mafanikio kati ya protini.Mbinu hii inaweza kuwa tu ya kukagua maktaba za ukubwa wa chini ya karibu 106. Upasuaji uliofaulu wa X-gal pia husababisha harufu mbaya inayoonekana kutokana na kubadilika kwa indole.

Kwa vile X-gal yenyewe haina rangi, uwepo wa bidhaa ya rangi ya buluu inaweza kutumika kama jaribio la kuwepo kwa β-galactosidase amilifu.

Utambulisho huu rahisi wa kimeng'enya amilifu huruhusu jeni ya βgalactosidase (jeni lacZ) kutumika kama jeni la ripota katika matumizi mbalimbali.