Bidhaa

Utaratibu wa Mycobacterium smegmatis G (MbsG), l-lysine monooxygenase inayotegemea flavin, ulichunguzwa chini ya hali ya utulivu na ya haraka ya athari kwa kutumia madoido ya isotopu ya kimsingi na ya kutengenezea, analogi za substrate, pH na athari za mnato wa viyeyusho kama uchunguzi wa kiufundi.Matokeo yanaonyesha kwamba l-lysine hufunga kabla ya NAD(P)H, ambayo husababisha kupungua kwa kiwango cha mara kwa mara cha kupunguza flauini.Kufunga l-lysine hakuna athari kwa kiwango cha oxidation ya flavin, ambayo hutokea katika mchakato wa hatua moja bila uchunguzi wa C4a-hydroperoxyflauini ya kati.Athari sawa ziliamuliwa na analogi kadhaa za substrate.Uoksidishaji wa Flavin haujitegemei pH huku profaili za pH za kcat/Km na kred/KD za NAD(P)H zinaonyesha thamani za pKa moja ya ~6.0, na shughuli zinazoongezeka kadri pH inavyopungua.Katika pH ya chini, enzyme inakuwa isiyounganishwa zaidi, ikitoa peroxide zaidi ya hidrojeni na superoxide.Uhamishaji wa haidridi huzuia kiwango kidogo katika pH ya upande wowote na huwa na kikomo zaidi katika pH ya chini.Athari ya mnato wa kutengenezea kinyume kwenye kcat/Km kwa NAD(P)H ilionekana katika pH ya upande wowote ilhali athari ya kawaida ya mnato wa viyeyusho ilizingatiwa katika pH ya chini.Kwa pamoja, matokeo yanaonyesha utaratibu wa kipekee ambapo mabadiliko ya kikwazo na nyeti ya pH ya mabadiliko hutokea katika majibu ya nusu-reductive, ambayo huathiri ufanisi wa lysine hydroxylation.