Bidhaa

Monogalactopyranosides ya fluorescein na fluorescein methyl ester: awali, hidrolisisi ya enzymatic na biotnylated β-galactosidase, na uamuzi wa mgawo wa uenezaji wa tafsiri.

Fluorescein monoglycosides (d-galactopyranoside (FMG) na d-glucopyranoside) na methyl ester (MFMG) zao zimetayarishwa kutoka kwa acetobromoglucose/galactose na fluorescein methyl ester kwa mavuno mazuri.Majaribio ya hidrolisisi ya enzymatic (kwa kutumia biotinilated β-galactosidase) ya derivatives ya galaktoni yamefanywa na vigezo vya kinetiki vilikokotolewa.Ongezeko la mara 15-20 la kiwango cha fluorescence limezingatiwa wakati wa hidrolisisi.Ongezeko la mstari wa fluorescence limebainika kwa muda mfupi na ukolezi mdogo wa substrate, na kufanya misombo hii muhimu na uchunguzi nyeti kwa galactosidase.Ukubwa wa thamani ya Michaelis–Menten (Km) kwa MFMG ni ya juu zaidi kuliko ile ya FMG ikipendekeza mabadiliko yanayowezekana ya substrate ya fluorojeni.Thamani ya Km ya β-Gal ya biotini iliyo na FMG ni ya chini kuliko ile ya kimeng'enya asilia.Uchunguzi huu unaonyesha mshikamano wa juu wa substrate ya kimeng'enya cha biotini kwa kulinganisha na kimeng'enya asilia.Vigawanyiko vya uenezaji wa utafsiri vimepimwa, kwa substrates za fluorojeni na bidhaa zote mbili, kwa kutumia taswira ya uunganisho wa fluorescence.Mgawo wa uenezaji wa tafsiri kwa substrates za fluorogenic na bidhaa za hidrolisisi ya enzymatic zimepimwa kuwa sawa, katika anuwai ya 3.5-4.5 × 10−10 m2 s-1.Kwa hivyo uboreshaji au ucheleweshaji wa kinetiki wa enzymatic kutokana na tofauti katika uhamaji wa tafsiri ya substrate na bidhaa haionekani hivyo.